Phản ứng Ksantoproteinovaya để protein: dấu hiệu và phương trình công thức

Để thiết lập các thành phần chất lượng của nhiều loại thực phẩm sử dụng phản ứng ksantoproteinovaya với protein. Sự hiện diện của các axit amin thơm trong hỗn hợp sẽ thay đổi trong một màu mẫu xét nghiệm dương tính.

protein là gì

Nó cũng được gọi là một loại protein, mà là một vật liệu xây dựng cho cơ thể sống. Protein duy trì kích thước cơ bắp, phục hồi cấu trúc mô bị thương và chết của các cơ quan khác nhau, có thể là tóc, da và dây chằng. Với sự tham gia của họ, tạo ra corpuscles máu đỏ, được điều chỉnh bởi các hoạt động bình thường của nhiều hormone và các tế bào hệ miễn dịch.

Đây là một phân tử phức tạp đó là một polypeptide có một khối lượng lớn hơn 6 ~ 10 ³ dalton. cấu trúc protein tạo thành amino acid trong một số lượng lớn các liên kết peptit cùng.

Cấu trúc của protein

Tính năng đặc biệt của các chất này so với trọng lượng phân tử peptide thấp là họ đã phát triển một cấu trúc không gian ba chiều, ảnh hưởng với mức độ khác nhau thu hút được hỗ trợ. Protein có bốn cấu trúc. Đối với mỗi trong số họ có những đặc điểm riêng của mình.

Làm cơ sở cho các tổ chức chính của các phân tử có nguồn gốc chuỗi axit amin, cấu trúc công nhận phản ứng ksantoproteinovaya với protein. Cấu trúc này là một kỳ lặp đi lặp lại liên kết peptit -Hn-CH-đồng, một gốc phần chọn lọc là những chuỗi bên trong các axit amin. Họ xác định tính hơn nữa chất như một toàn thể.

Cấu trúc protein chính được coi là đủ mạnh, điều này là do sự hiện diện của các tương tác cộng hóa trị mạnh vào trái phiếu peptide. Sự hình thành các cấp tiếp theo xảy ra tùy thuộc vào các thuộc tính thiết lập trong giai đoạn đầu.

Sự hình thành các cấu trúc thứ cấp có thể do xoắn của chuỗi axit amin trong một vòng xoáy, trong đó liên kết hydro được thiết lập giữa các lượt.

tổ chức cấp đại học của các phân tử hình thành bằng cách áp dụng một trong những vòng xoáy trên các mảnh vỡ khác với sự xuất hiện của tất cả các kết nối có thể có giữa họ, với hydro, disulfua, kết cộng hóa trị hoặc hợp chất ion. Kết quả là các hiệp hội theo hình thức giọt.

Việc bố trí không gian của các cấu trúc đại học với sự hình thành liên kết hóa học giữa chúng dẫn đến sự hình thành của các hình thức cuối cùng của phân tử hoặc cấp bậc bốn.

axit amin

Họ gây ra các tính chất hóa học của protein. Có khoảng 20 axit amin quan trọng chiếm các polypeptide trong một chuỗi khác nhau. Đây cũng được gọi axit aminocarboxylic hiếm trong hydroxyproline và hydroxylysine hình thức có nguồn gốc peptide cơ bản.

Như một dấu hiệu của phản ứng protein nhận ksantoproteinovaya, sự hiện diện của các axit amin nhất định cung cấp sự thay đổi màu sắc của thuốc thử, cho thấy sự hiện diện của các cấu trúc đặc biệt trong thành phần của họ.

Khi nó bật ra, họ là các axit cacboxylic đã xảy ra thay thế nguyên tử hydro vào nhóm amin.

Một cấu trúc ví dụ về các phân tử có thể phục vụ một công thức cấu glyxin (HNH- HCH- COOH) như axit amin đơn giản nhất.

Trong trường hợp này là một trong những hydro CH ₂ - có thể được thay thế bằng một carbon còn triệt để bao gồm một vòng benzen, amin, sulfo, carboxy.

Những gì hiện phản ứng ksantoproteinovaya

Đối với phân tích định tính các protein bằng các kỹ thuật khác nhau. Chúng bao gồm các phản ứng:

• biuret với sự xuất hiện của màu tím;
• ninhydrin để tạo thành một giải pháp xanh tím;
• formaldehyde với việc thành lập một màu đỏ;
• Nogier để kết tủa màu xám đen.

Khi thực hiện mỗi phương pháp chứng minh sự hiện diện của protein và sự hiện diện của các nhóm chức năng nhất định trong phân tử của họ.

Có ksantoproteinovaya phản ứng với protein. Nó cũng được gọi là sự phân hủy Mulder. Nó đề cập đến các phản ứng màu cho protein, trong đó có axit amin thơm và dị vòng.

Một đặc điểm của một quá trình mẫu như là nitrat hóa axit nitric dư lượng axit amin cyclic đặc biệt sự gia nhập của các nhóm nitro vào vòng benzen.

Kết quả của quá trình này là sự hình thành các hợp chất nitro, mà kết tủa. Đây là phản ứng đặc trưng ksantoproteinovaya cơ bản.

Có gì xác định các axit amin

Không phải tất cả axit aminocarboxylic thể được phát hiện bằng cách sử dụng mẫu đó. Các tính năng chính của phản ứng phát hiện protein ksantoproteinovaya - sự hiện diện của vòng benzen hoặc vòng dị vòng trong phân tử axit amin.

Bởi vì protein được tách ra từ các axit aminocarboxylic hai thơm, trong đó có một nhóm phenyl (ví phenylalanin), và một hydroxyphenyl triệt để (trong tyrosine).

Với phản ứng ksantoproteinovaya được xác định dị vòng tryptophan axit amin, indol có một nhân thơm. Sự hiện diện của các hợp chất trên trong protein cung cấp cho sự thay đổi màu sắc đặc trưng của môi trường thử nghiệm.

Có gì thuốc thử sử dụng

Đối với việc thực hiện các phản ứng ksantoproteinovaya cần phải chuẩn bị một giải pháp 1% protein trứng, hoặc nguồn gốc thực vật.

Thường được sử dụng trứng, được chia tách thêm protein từ lòng đỏ. Đối với dung dịch 1% protein đã được pha loãng trong một khoảng gấp mười lần của nước tinh khiết. Sau khi giải thể dẫn đến chất lỏng protein nên được lọc qua nhiều lớp vải. Giải pháp này cần được bảo quản ở nơi thoáng mát.

Có thể thực hiện các phản ứng với một loại protein thực vật. Để chuẩn bị các giải pháp được sử dụng bột mì trong một lượng 0,04 kg. 0,16 l nước tinh khiết. Các thành phần được trộn lẫn trong một bình được gắn trong 24 giờ ở nơi thoáng mát ở nhiệt độ khoảng + 1 ° C. Vào cuối ngày là giải pháp được khuấy, sau đó bằng phương pháp lọc đó đầu tiên bằng bông gòn và sau đó - một tờ giấy lọc gấp. Chất lỏng dẫn được giữ trong một nơi mát mẻ. Giải pháp này là chủ yếu hiện diện trong phần albumin.

Đối với việc thực hiện các ksantoproteinovaya phản ứng như các thuốc thử sử dụng conc axit nitric chính. thuốc thử nữa là một giải pháp của 10% natri hydroxit hoặc amoniac, giải pháp gelatin và phenol unconcentrated.

Phương pháp luận của

Trong một ống sạch được làm bằng 1% dung dịch protein trứng -thứ hoặc bột trong một số lượng 2 ml. Để này được thêm vào khoảng 9 giọt axit nitric đậm đặc để kết tủa dừng lại. Hỗn hợp thu được đun nóng, dẫn đến kết tủa màu vàng dần dần biến mất và màu sắc của nó đi vào giải pháp.

Khi chất lỏng nguội xuống trong ống dọc theo bức tường thêm khoảng 9 giọt sodium hydroxide, tập trung, đó là dư thừa cho quá trình này. Chất phản ứng trở nên kiềm. Nội dung trở thành màu cam trong ống nghiệm.

Đặc điểm của

Kể từ ksantoproteinovaya gọi là phản ứng định tính axit nitric do tác động của các protein, mẫu được thực hiện dưới bao gồm tủ hút. Tuân theo tất cả biện pháp phòng ngừa an toàn khi làm việc với các chất ăn da tập trung.

Việc phát hành nội dung từ các ống có thể xảy ra trong suốt quá trình làm nóng mà phải được xem xét khi sửa chữa nó trong một ngăn chứa và chọn độ nghiêng.

Quay số bằng axit nitric đậm đặc và xút chỉ nên sử dụng một pipette thủy tinh và lê cao su cấm pipette qua đường miệng.

phản ứng tương đối với phenol

Để làm rõ, xử lý và xác nhận sự hiện diện của các nhóm phenyl được thực hiện với một hydroxybenzene mẫu tương tự.

Các ống làm 2 ml phenol pha loãng, sau đó dần dần dọc theo bức tường, đã được bổ sung 2 ml axit nitric đậm đặc. Các giải pháp đã phải chịu để sưởi ấm, nhờ đó mà nó trở thành màu vàng. Phản ứng này là chất lượng của sự hiện diện của vòng benzen.

Process hydroxybenzene nitro với axit nitric sau đó hình thành một hỗn hợp của p-nitrophenol và o-nitrophenol trong một tỷ lệ từ 15 đến 35.

thử nghiệm so sánh với gelatin

Để chứng minh rằng phản ứng ksantoproteinovaya với protein cho thấy một loại axit amin có cấu trúc thơm, sử dụng protein mà không có một nhóm phenolic.

Trong một ống sạch được làm bằng 1% dung dịch gelatin trong một lượng 2 ml. Để này được thêm vào khoảng 9 giọt axit nitric đậm đặc. Hỗn hợp được gia nhiệt. Các giải pháp được không màu màu vàng, chứng tỏ sự vắng mặt của các axit amin với một cấu trúc thơm. Đôi khi có một vàng nhẹ của môi trường do sự hiện diện của các tạp chất protein.

phương trình hóa học

Trong phản ứng hai bước chạy ksantoproteinovaya protein. Công thức đầu tiên quá trình nitrat hóa giai đoạn mô tả các phân tử axit amin sử dụng axit nitric đậm đặc.

Một ví dụ là tập tin đính kèm của nhóm nitro vào tyrosine để tạo nitrotyrosine và dinitrotirozina. Trong trường hợp đầu tiên vào vòng benzen được gắn một NO ₂ -radical, và các hợp chất thứ hai có hai nguyên tử hydro được thay thế bằng NO _2. phản ứng tyrosine thức ksantoproteinovaya hóa đại diện bằng phản ứng với axit nitric để tạo thành phân tử nitrotyrosine.

Quá trình nitrat hóa được đi kèm bởi màu không màu chuyển tiếp trong giai điệu vàng. Khi thực hiện phản ứng này với protein có chứa các axit amin dư lượng phenylalanine hoặc tryptophan, và màu sắc của dung dịch chuyển.

Bước thứ hai là sản phẩm phản ứng của nitrat hóa của các phân tử tyrosine, đặc biệt là nitrotyrosine, với amoni hoặc natri hydroxit. Kết quả là một natri hoặc muối amoni trong đó màu vàng-cam. một phản ứng như vậy có liên quan đến khả năng của các phân tử nitrotyrosine di chuyển theo hình thức quinoid. Sau đó muối được hình thành từ đó axit nitronic, trong đó có một hệ thống quinone của liên kết đôi liên hợp.

Như vậy kết thúc phản ứng ksantoproteinovaya với protein. Phương trình trình bày ở trên bước thứ hai.

kết quả

Trong quá trình phân tích chất lỏng chứa trong ba ống, dung dịch đối chiếu được pha loãng với phenol. Chất với một vòng benzen cho phản ứng định tính với axit nitric. Kết quả là, nó thay đổi màu sắc của dung dịch.

Như được biết, gelatin bao gồm một hình thức thủy phân của collagen. Protein không chứa các cấu trúc thơm của các axit amin. Không có thay đổi về màu sắc của môi trường bằng phản ứng với một axit.

Trong ống nghiệm thứ ba có một phản ứng tích cực với protein ksantoproteinovaya. Kết luận có thể được rút ra như sau: tất cả các protein có cấu trúc thơm, cho dù đó là một nhóm phenyl hoặc một vòng indol, do sự thay đổi về màu sắc của dung dịch. Điều này là do sự hình thành các hợp chất nitro với một màu vàng.

Thực hiện một phản ứng màu chứng tỏ sự hiện diện của các cấu trúc hóa học khác nhau trong axit amin và protein. VÍ DỤ gelatin cho thấy rằng thành phần của nó bao gồm axit aminocarboxylic không có một nhóm phenyl hoặc một cấu trúc vòng.

Với ksantoproteinovaya phản ứng có thể được giải thích bằng vàng da khi áp dụng cho nó một axit nitric mạnh. Cùng màu sẽ trở nên sữa sủi bọt trong phân tích tương tự của mình.

Trên thực tế phòng thí nghiệm lâm sàng mẫu màu này không được sử dụng để phát hiện protein trong nước tiểu. Điều này là do màu vàng của nước tiểu của chính nó.

phản ứng Ksantoproteinovaya trở nên ngày càng được sử dụng để định lượng các axit amin như tryptophan và tyrosine, như là một phần của các protein khác nhau.