Phương pháp vi trong Vi sinh vật

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. phương pháp nghiên cứu vi là cách để khám phá một loạt các đối tượng với việc sử dụng các thiết bị đặc biệt. Nó cho phép chúng ta xem xét cấu trúc của các chất và sinh vật, độ lớn trong số đó là vượt ra ngoài giới hạn của độ phân giải của mắt người. Bài báo đưa ra một phân tích ngắn gọn về các phương pháp kính hiển vi.

Tổng quan

используют в своей практике разные специалисты. phương pháp hiện đại kiểm tra bằng kính hiển vi sử dụng các chuyên gia khác nhau trong thực tế của họ. Trong số đó có các nhà virus học, tế bào học, huyết học, hình thái, và những người khác. Các phương pháp chính của kiểm tra bằng kính hiển vi được biết đến với một thời gian dài. Đầu tiên là một cách ánh sáng nhìn đối tượng. Trong những năm gần đây, chủ động đưa vào thực tế, và các công nghệ khác. . Do đó, sự phổ biến của mua giai đoạn có độ tương phản, phát quang, sự can thiệp, phân cực, hồng ngoại, tia cực tím, phương pháp lập thể của nghiên cứu. Tất cả đều dựa trên một loạt các tính chất của ánh sáng. . Bên cạnh đó, sử dụng rộng rãi phương pháp kính hiển vi điện tử. Những phương pháp này cho phép các đối tượng hiển thị bằng một dòng chảy hướng các hạt tích điện. Cần lưu ý rằng các phương pháp nghiên cứu được sử dụng không chỉ trong sinh học và y học. в промышленности. phương pháp khá phổ biến của nghiên cứu vi mô của kim loại và hợp kim trong ngành. Điều này cho phép nghiên cứu để đánh giá hành vi của các hợp chất để sản xuất các công nghệ để giảm thiểu khả năng gãy xương và tăng sức mạnh.

cách ánh sáng: đặc điểm

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. phương pháp vi như vậy để nghiên cứu vi sinh vật và các cơ sở khác dựa trên khác nhau có độ phân giải thiết bị. Một yếu tố quan trọng ở đây là sự chỉ đạo của các đặc điểm chùm của đối tượng riêng của mình. Sau này, đặc biệt, có thể là trong suốt hoặc mờ đục. Phù hợp với các thuộc tính của đối tượng, thay đổi tính chất vật lý của thông lượng ánh sáng - độ sáng và màu sắc do biên độ và bước sóng, máy bay, giai đoạn và phương truyền sóng. . Về việc sử dụng những đặc điểm và xây dựng phương pháp vi khác nhau.

đặc tính

Để nghiên cứu các cách của các đối tượng ánh sáng, thường là màu. Điều này làm cho nó có thể để xác định và mô tả các hoặc các tài sản khác. Nó là cần thiết rằng các mô đã được cố định, kể từ khi màu tiết lộ cấu trúc nhất định độc quyền trong các tế bào chết. Trong sinh hoạt các tế bào tách một loại thuốc nhuộm theo hình thức không bào trong tế bào chất. Cô ấy không vẽ trên cấu trúc. Nhưng với các đối tượng trực tiếp và có thể được điều tra sử dụng một kính hiển vi ánh sáng. Với mục đích này, cách quan trọng của việc học tập. Trong trường hợp này, một bình ngưng vùng tối. Nó được nhúng vào trong kính hiển vi ánh sáng.

Nghiên cứu đối tượng không sơn

Nó được thực hiện bằng kính hiển vi giai đoạn có độ tương phản. Phương pháp này được dựa trên sự nhiễu xạ của chùm phù hợp với đặc điểm của đối tượng. Trong quá trình tiếp xúc đánh dấu sự thay đổi trong giai đoạn và bước sóng. Trong ống kính hiển vi hiện diện tấm mờ. Sống hoặc cố định, nhưng không phải đối tượng sơn do tính minh bạch của nó, gần như không thay đổi màu sắc, và biên độ của chùm tia đi qua chúng, kích động chỉ một sự thay đổi của giai đoạn sóng. Nhưng trong trường hợp này, sau khi đi qua các đối tượng, thông lượng ánh sáng lệch hướng bởi các tấm. Kết quả là, giữa dầm, thiếu thông qua các đối tượng và tham gia vào một nền ánh sáng, sự khác biệt chiều dài sóng xảy ra. Tại một giá trị nhất định của hiệu ứng hình ảnh của nó xảy ra - đối tượng tối sẽ được rõ ràng trên nền sáng, hoặc ngược lại (phù hợp với các đặc điểm của một tấm pha). Để có được sự khác biệt này nên có ít nhất 1/4 bước sóng.

phương pháp Anoptralny

Ông là một loại phương pháp pha phản. phương pháp Anoptralny liên quan đến việc sử dụng một ống kính với tấm đặc biệt, mà chỉ thay đổi màu sắc và độ sáng của ánh sáng xung quanh. Điều này mở rộng đáng kể khả năng nghiên cứu vật thể sống không nhiễm ô. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. phản pha nghiên cứu ứng dụng phương pháp kính hiển vi trong vi sinh, ký sinh trùng trong việc nghiên cứu tế bào thực vật và động vật, động vật nguyên sinh. Trong phương pháp huyết học được sử dụng để tính toán và xác định sự khác biệt của các tế bào máu và tủy xương.

các kỹ thuật can thiệp

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Những phương pháp nghiên cứu vi thường giải quyết những vấn đề tương tự như trái ngược pha. Tuy nhiên, trong trường hợp thứ hai, các chuyên gia chỉ có thể quan sát những đường nét của đối tượng. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Sự giao thoa phương pháp nghiên cứu vi cho phép chúng ta nghiên cứu phần mình, thực hiện một yếu tố đánh giá định lượng. Điều này có thể do sự tách của chùm ánh sáng. Một dòng đi qua các đối tượng hạt, và người kia - bởi. Trong thị kính của kính hiển vi họ gặp gỡ và can thiệp. Kết quả là độ lệch pha có thể được xác định bằng trọng lượng của cấu trúc tế bào khác nhau. Khi đo liên tiếp là với định trước chỉ số khúc xạ có thể được thiết lập mô dày không cố định và đối tượng sống, hàm lượng protein trong đó, nồng độ của các chất rắn và nước, và vân vân. Phù hợp với các chuyên gia dữ liệu nhận được có thể gián tiếp đánh giá tính thấm màng, hoạt động của enzyme, chuyển hóa tế bào.

sự phân cực

Nó được thực hiện bằng phương tiện của Nicol lăng trụ hoặc Polaroids filmy. Chúng được đặt giữa các mẫu và các nguồn ánh sáng. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. phương pháp kính hiển vi phân cực nghiên cứu về vi sinh cho phép chúng ta nghiên cứu các đối tượng với các thuộc tính không đồng nhất. Trong cấu trúc đẳng hướng tốc độ lan truyền của ánh sáng không phụ thuộc vào máy bay được chọn. Trong tỷ lệ hệ thống đẳng hướng thay đổi tùy theo ánh sáng theo định hướng dọc ngang hoặc trục dọc của đối tượng. Nếu giá trị chỉ số khúc xạ cùng cấu trúc sẽ lớn hơn dọc theo chiều ngang, tạo ra một sự khúc xạ kép tích cực. Đây là điển hình của nhiều đối tượng sinh học đã tìm thấy một định hướng phân tử nghiêm ngặt. Tất cả họ đều là đẳng hướng. Trong thể loại này, đặc biệt là các myofibrils, neurofibrils, lông mao trong biểu mô lông, sợi collagen, và những người khác.

giá trị phân cực

Một so sánh về bản chất của bức xạ và tính không đẳng hướng chỉ số khúc xạ của đối tượng làm cho nó có thể để ước tính cấu trúc phân tử của tổ chức. phương pháp phân cực đóng vai trò như một trong những phương pháp phân tích mô học được sử dụng trong tế bào học và vân vân. Không chỉ đối tượng vẽ có thể được nghiên cứu trong ánh sáng. phương pháp phân cực làm cho nó có thể kiểm tra không nhiễm ô và chưa được định hình - có nguồn gốc - Chế phẩm của phần mô.

kỹ thuật huỳnh quang

Chúng được dựa trên các thuộc tính của đối tượng nhất định cho phát sáng trong phần màu xanh tím của quang phổ hoặc tia cực tím. Nhiều chất như protein, một số vitamin, coenzyme, ma túy, ưu đãi với một (en) phát quang chính. các đối tượng khác bắt đầu phát sáng bằng cách thêm một fluorochrome - Thuốc nhuộm đặc biệt. Những chất phụ gia chọn lọc khuếch tán hoặc phân bổ vào các cấu trúc tế bào riêng biệt hoặc các hợp chất hóa học. Khách sạn này là cơ sở của việc sử dụng kính hiển vi huỳnh quang với histochemical và nghiên cứu tế bào học.

Các lĩnh vực sử dụng

Sử dụng chuyên gia miễn dịch huỳnh quang phát hiện kháng nguyên virus và nồng độ của họ điều chỉnh được xác định virus chống cơ thể và kháng nguyên, kích thích tố, các sản phẩm trao đổi chất khác nhau và như vậy. Về vấn đề này, việc chẩn đoán herpes, quai bị, viêm gan B, cúm và nhiễm trùng khác sử dụng phương pháp huỳnh quang của nghiên cứu tài liệu. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. phương pháp miễn dịch huỳnh quang cực nhỏ phát hiện bệnh ác tính của khối u, xác định khu vực thiếu máu cục bộ của trung tâm trong giai đoạn đầu của một cơn đau tim và vân vân.

Việc sử dụng tia cực tím

Nó được dựa trên khả năng của một số chất có trong tế bào sống hoặc vi sinh vật cố định, nhưng uncolored trong suốt dưới ánh sáng nhìn thấy vải hấp thụ tia UV của một bước sóng cụ thể. Điều này đúng đặc biệt đối với các hợp chất cao phân tử. Chúng bao gồm protein, axit thơm (methylalanine, tryptophan, tyrosine, vv), axit nucleic và các căn cứ purine piramidinovye và vân vân. kính hiển vi tia cực tím cho phép xác định vị trí và số lượng các hợp chất này. Trong nghiên cứu của các chuyên gia sinh vật sống có thể quan sát những thay đổi trong quá trình trao đổi chất của họ.

bổ sung

kính hiển vi hồng ngoại được sử dụng trong nghiên cứu này được đục ra ánh sáng và tia cực tím thông qua sự hấp thụ của các đối tượng chảy cấu trúc có bước sóng 750-1200 nm. Để áp dụng phương pháp này không cần đến trước vạch trần các loại thuốc để điều trị hóa chất. Thông thường, phương pháp IR được sử dụng trong nhân chủng học, động vật học và khoa học khác ngành. Đối với y học, phương pháp này được sử dụng chủ yếu trong nhãn khoa và Neuromorphology. Các đối tượng nghiên cứu chiều bằng cách sử dụng một kính hiển vi lập thể. thiết kế phần cứng cho phép giám sát bằng mắt trái và phải ở một góc độ khác nhau. đối tượng đục được điều tra ở độ phóng đại tương đối thấp (120 lần nhiều nhất). phương pháp lập thể được sử dụng trong vi phẫu, Pathomorphology trong y học pháp y.

kính hiển vi điện tử

Nó được sử dụng để nghiên cứu cấu trúc của các tế bào và các mô ở các cấp độ phân tử và dưới tế bào. Hiển vi điện tử cho phép chúng tôi thực hiện một bước nhảy vọt về chất lượng trong lĩnh vực nghiên cứu. Phương pháp này được sử dụng rộng rãi trong hóa sinh, ung thư, virus, hình thái học, miễn dịch học, di truyền học, và các lĩnh vực khác. tăng cường đáng kể độ phân giải được cung cấp bởi các thiết bị dòng chảy công suất của các electron mà đi qua các trường điện từ chân không. Sau đó, đến lượt nó, tạo ra ống kính đặc biệt. Electron có thể đi qua cơ cấu của đối tượng hoặc phản xạ từ chúng với độ lệch từ các góc độ khác nhau. Kết quả sẽ được hiển thị trên màn hình huỳnh quang của thiết bị. Nếu kính hiển vi truyền view phẳng thu được khi quét tương ứng bao quanh.

Điều kiện tiên quyết

Điều đáng chú ý là trước khi kiểm tra bằng kính hiển vi điện tử vượt qua, đối tượng phải chịu huấn luyện đặc biệt. Đặc biệt, việc sử dụng vào việc định hình vật lý hoặc hóa học của các mô và các sinh vật. tài liệu cắt sinh thiết và, ngoài ra, tách nước, được nhúng trong nhựa epoxy, cắt dao kính hay kim cương trên phần siêu mỏng. Sau đó, độ tương phản và nghiên cứu của họ. Kính hiển vi quét kiểm tra bề mặt của đối tượng. Để làm điều này, họ phun một chất đặc biệt trong buồng chân không.